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超速离心机的离心方法有哪些?

信息来源: 长沙湘锐离心机有限公司     发布时间:2019-01-05    阅读:

  高速冷冻离心机一般在常压空气中旋转,具有大功率驱动电机和制冷压缩机。今天湘锐离心机和大家讲讲有关于超速离心机的离心方法有哪些?超速离心机的离心方法是什么?

  一、差速离心

  这种方法是选择不同转速的离心,分别分离各个不同组分。例如先用低速沉降大颗粒和上清液,在高速离心上清沉降中等颗粒,**超速离心上清沉降小颗粒。采用逐级提高离心力分离上情液的方法,把不同大小的颗粒分开。这种方法比较简单、方便,分离的组份沉到管底,因此可以迅速浓缩所要的组份,减少体积。但回收率和纯度是有矛盾的,要提高回收率,势必提高转速或延长离心时间,这样大小相近的颗粒也会沉到管底,因此该法多用于粗提纯或初步浓缩样品。

 

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  二、速度区带(或速度梯度)离心

  本法是将样品放在一个连续的密度梯度液体上,通过离心,大颗粒沉降快,小颗粒沉降慢。经过一段时间,相同的颗粒就在同一深度形成一条带子,因此把各种组份分开来。它适用于分离密度相同、而大小不同的物质,如不同的蛋白质组份密度都差不多,但分子量不一样,用本法很容易将其分开。但对密度不同、大小类似的物质则不易分离。蔗糖梯度是一种常用的介质。用不同浓度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,用于梯度离心,再分别进行收集处于不同区带里的各个组份。

  三、沉降平衡离心

  这是静力学的方法,在离心管中形成一个液体梯度,在离心时各组份以不同的速度下沉,但最终停留在与自己相同的密度中,形成一条狭窄的平衡带,并保持相对的稳定。为了使样品所有组份都能达到它们的平衡位置,需要长时间离心。这种方法适用于分离大小相似但密度不同的物质,如核酸的分离。氯化铯梯度是常用于平衡离心的介质,分辨率很高,可区别密度相差0.05的组分,但离心时间需十几到几十小时,且价格很贵。已有一种商品名叫"Percoll"的聚蔗糖溶液可以代替氯化铯梯度。该介质能迅速形成梯度,使离心时间大大缩短到1-2h而仍有很好的分离效果。并且有配套的标记珠(Densitymarkerbeads)可以测定样品的密度。

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